抗生素对各人来说并不生疏？股刈魑恢窒滓，普遍应用于种种疾病的治疗中，但滥用其危害也是显而易见的；近年来，除了西欧国家在地表水中发明抗生素超标外，我国一些科研职员在长江的抽样检测中也发明了抗生素含量高的征象。这些抗生素大多由医疗废水、生涯污水、水产养殖废水、动物用药、饲料等排放到地表水中，然后部分通过饮用水进入人体。这也是近年来出台多项水中抗生素检测标准的缘故原由。

今天就来说说液相色谱-三重四极杆质谱检测水中抗生素的要领。该要领的检测原理是将网络到的水质样品经0.22pm滤膜过滤，与乙腈1:1混淆，用液相色谱-三重四级杆质谱仪测定。凭证保存时间和特征离子定性，外标法定量。

一、检测所用试剂：

1.乙腈：色谱纯。

2.甲酸：色谱纯。

4.50%乙腈溶液：取50ml乙腈，用水稀释至100ml。

5.0.1%甲酸水溶液：取lml甲酸，用水稀释至1000ml。

6.标准品：红霉素，含量≥97.0%；青霉素，含量≥98.0%。

7.红霉素标准储备液浓度为100ug/ml。准确称10.0mg红霉素标准产品，用乙腈消融稀释成浓度为100ug/ml的标准储备液；也可以直接购置有证标准溶液，在-10℃以下冷冻，避光生涯；或者参照厂家的产品说明书生涯，使用时应恢复室温，摇匀。

8.青霉素标准储备液浓度为100ug/ml。准确称10.0mg青霉素标准产品，用50%乙腈溶液消融稀释成浓度为100ug/ml的标准储备液；也可以直接购置有证标准溶液，在-10℃以下冷冻，避光生涯；或者参照厂家的产品说明书生涯，使用时应恢复室温，摇匀。

9.红霉素和青霉素混淆标准使用液:浓度为10.0ug/ml。红霉素和青霉素标准储备液划分在10.0ml容量瓶中取1.00ml，用50%乙腈溶液定容，可获得红霉素和青霉素混淆标准使用液。

10.滤膜：一次性针式过滤器，0.22um，混淆纤维素酯(MCE)质料。

11.一次性聚丙烯针管。

二、检测所用仪器：

1.液相色谱-三重四级杆质谱仪：配有电喷雾离子源(ESI)，具有梯度洗脱和多反应监测功效。

2.剖析天平：感量为0.0001g。

3.样品瓶：100毫升磨口或带聚四氟乙烯内衬瓶盖的棕色玻璃瓶。

4.微量注射器或移液器：10ul、50ul、100ul、500ul、1.0ml。

三、收罗和制备水样:

我们可以凭证有关划定网络水质样品。收罗水样时，应充满样品瓶，无误差。冷藏在4℃以下，避光生涯。2d内完身剖析。

四、水样的制备:

水样应充分混淆，取约10ml样品，用0.22um滤膜过滤。放弃至少1ml的初始滤液后，准确将500ul过滤后的样品从棕色进样瓶中取出，然后加入500ul乙腈，待测试。

制备空缺水样。用实验室一级纯水取代水样，然后凭证水样制备办法操作空缺水样。

五、检测办法：

1.液相色谱条件：

色谱柱为C18(100mmX2.1mm，粒径1.7um)，或相等；流动相为A:乙腈，B:0.1%甲酸水溶液；流速为0.25ml/min；柱温为30℃；进样体积为10ul；流动相梯度洗脱程序

2.质谱条件：

离子源为电喷雾离子源(ESI)；扫描要领为正离子模式；监测要领为多反应监测(MRM)；去溶剂气、锥孔气、碰撞气均为高纯氮气或其他合适气体。

3.建设标准曲线：

取适量红霉素和青霉素混淆标准用液，用50%乙腈溶液稀释，制备至少5个浓度点的标准系列溶液。标准溶液中红霉素和青霉素的参考浓度划分为0.100ug/L、0.200ug/L、0.500ug/L、1.00ug/L、2.00ug/L、5.00ug/L、10.0ug/L和20.0ug/L。凭证划定的仪器条件，从低浓度到高浓度依次丈量标准系列溶液。以目的化合物的质量浓(ug/L)为横坐标，以响应的响应值为纵坐标，建设标准曲线。

六、水样的测定：

按划定的仪器条件丈量准备好的水样。定性剖析可以在相同的色谱/质谱条件下丈量标准溶液和样品。凭证标准溶液色谱图的保存时间和样品的保存时间，标准溶液各色谱峰的特征离子与样品各色谱峰的特征离子相对定性。样品与标准物质保存时间的相对误差不大于5%。样品稚窨的化合物定性子离子的相对品貌(Ksam)。与浓度相近的标准溶液中响应定性离子的相对品貌(Kskd)相比，相对品貌误差不凌驾相关图表划定的规模，可以判断样品中保存响应的目的化合物。水样中红霉素、青霉素的质量浓度可直接按公式盘算。